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B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)建議

英文名稱(chēng):B16-F10

中文名稱(chēng):小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞

種   屬:鼠源

組織來(lái)源:器官;皮膚;品系:C57BL/6J;疾??;黑色素瘤

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài):梭形細(xì)胞樣;上皮細(xì)胞樣

傳代比例:1:2 ~ 1:4

換液頻率:2~3次/周

倍增時(shí)間:48-72h

培養(yǎng)體系:DMEM(高糖)+10%FBS+1%P/S

培養(yǎng)條件:5%CO2;37 ℃

凍存條件:Biochannel細(xì)胞凍存液,程序降溫,液氮長(zhǎng)期保存。


【細(xì)胞培養(yǎng)特點(diǎn)】



1. 該細(xì)胞在DMEM(含1.5g/L NaHCO3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/LNaHCO3)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提高CO2濃度(7%-10%)。

2. 該細(xì)胞我們推薦的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是DMEM(高糖)培養(yǎng)基;

3. 據(jù)反映DMEM養(yǎng)B16-F10,細(xì)胞會(huì)很黑,分泌黑素量比較多;而1640養(yǎng)比較白,黑素分泌量比較少。(依據(jù)實(shí)驗(yàn)需求可嘗試更換培養(yǎng)體系,更換時(shí)建議留種);

4.更換為DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)時(shí),請(qǐng)保證血清和培養(yǎng)液質(zhì)量,不然營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞不長(zhǎng)、生長(zhǎng)緩慢以及黑色素大量分泌。


【常見(jiàn)問(wèn)題】

Q: 收貨時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)偽足,或是碎片較多怎么辦?

A:受到運(yùn)輸影響,懸浮細(xì)胞會(huì)短暫性出現(xiàn)形態(tài)改變的現(xiàn)象,如偽足等。通過(guò)傳代培養(yǎng),1周左右可以恢復(fù)正常。一些細(xì)胞在運(yùn)輸途中死亡而產(chǎn)生碎片,通過(guò)傳代離心可以去除(見(jiàn)上文傳代篇)。

Q:培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞發(fā)生貼壁怎么辦?

A: 少量細(xì)胞貼壁屬于正常情況,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至新瓶中即可。當(dāng)貼壁細(xì)胞的比例高于20%,說(shuō)明細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境有異常,需排查培養(yǎng)箱設(shè)置、培養(yǎng)基成分,以及培養(yǎng)器皿是否異常。

Q:培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞發(fā)生聚團(tuán)怎么辦?

A:少量細(xì)胞聚團(tuán),呈葡萄串狀,屬于正?,F(xiàn)象,特別是細(xì)胞密度較低時(shí),易出現(xiàn)這種情況。更換血清品牌或增大血清比例(不超過(guò)20%)有助于解決聚團(tuán)問(wèn)題。不建議將聚團(tuán)的細(xì)胞吹散,等待密度高時(shí),會(huì)自己分散開(kāi)。

Q:培養(yǎng)基里一定要加β-巰基乙醇嗎?

A:β-巰基乙醇是一種常用的培養(yǎng)補(bǔ)充劑,有抗氧化的作用,可減少氧化應(yīng)激對(duì)THP-1細(xì)胞的影響。當(dāng)細(xì)胞密度過(guò)大但需要維持時(shí),可適當(dāng)增加巰基乙醇的比例(不超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)量的1.5倍)。

Q:鏡下觀(guān)察時(shí),難以聚焦或估算密度怎么辦?

A:懸浮細(xì)胞會(huì)隨著液體流動(dòng),不容易聚焦,靜置5-10min使細(xì)胞沉底,之后在輕輕放上顯微鏡觀(guān)察,將有助于聚焦和估算細(xì)胞密度。


【森貝伽細(xì)胞優(yōu)勢(shì)】

1、高品質(zhì)細(xì)胞資源

人、鼠源細(xì)胞系提供STR,其他種屬細(xì)胞可以提供種屬鑒定;

2、產(chǎn)品齊全

搭配森貝伽自有胎牛血清、完全培養(yǎng)基,讓您的細(xì)胞培養(yǎng)全程無(wú)憂(yōu);

3、供應(yīng)鏈優(yōu)勢(shì)

現(xiàn)貨細(xì)胞閃電發(fā)貨,全國(guó)可達(dá);

4、ATCC等權(quán)威細(xì)胞庫(kù)

代數(shù)低、狀態(tài)好、無(wú)污染;

5、廠(chǎng)家優(yōu)勢(shì)

貨期短,貨期1-2周;

6、凍存細(xì)胞庫(kù)管理

避免源頭污染,低溫集中供液,有效保障細(xì)胞復(fù)蘇后的存活率;

7、專(zhuān)業(yè)服務(wù)

完善的技術(shù)支持服務(wù)和售后保障;

8、四級(jí)細(xì)胞庫(kù)管理

減少交叉感染,安全性更高,快捷拿取,提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率。