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慢凍：這一步驟主要是為了防止細胞在冷凍過程中形成冰晶，從而對細胞造成損害。通過緩慢降低溫度，細胞可以逐步脫水，減少胞內(nèi)冰晶的形成，從而保護細胞結(jié)構(gòu)不受破壞。此外，加入低溫保護劑（如DMSO）也能提高胞膜對水的通透性，降低冰點，延緩凍結(jié)過程，進一步減少冰晶對細胞的損傷。

速融：在復(fù)蘇過程中，快速融化是必要的，以防止DMSO在液體狀態(tài)下對細胞的毒害作用。快速融化能使細胞迅速進入復(fù)蘇和生長狀態(tài)，避免由于緩慢融化導致的水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶，從而對細胞造成損傷。

慢凍：這一步驟主要是為了防止細胞在冷凍過程中形成冰晶，從而對細胞造成損害。通過緩慢降低溫度，細胞可以逐步脫水，減少胞內(nèi)冰晶的形成，從而保護細胞結(jié)構(gòu)不受破壞。此外，加入低溫保護劑（如DMSO）也能提高胞膜對水的通透性，降低冰點，延緩凍結(jié)過程，進一步減少冰晶對細胞的損傷。

速融：在復(fù)蘇過程中，快速融化是必要的，以防止DMSO在液體狀態(tài)下對細胞的毒害作用。快速融化能使細胞迅速進入復(fù)蘇和生長狀態(tài)，避免由于緩慢融化導致的水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶，從而對細胞造成損傷。

細胞復(fù)蘇后只有非常少量細胞貼壁，是不是需要重新復(fù)蘇？先不要著急丟掉！可以補加血清和細胞因子，或者每隔 2-3 天換新鮮的生長培養(yǎng)基，經(jīng)過 2-3 次換液后，大部分細胞就能看到明顯增殖，此時再按照正常傳代操作即可。

細胞復(fù)蘇后剛開始已經(jīng)貼壁了狀態(tài)不錯，后面第二天開始出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，這個情況可能是凍存前細胞消化過度，或者凍存中收凍存液殺害細胞凋亡導致的情況。